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    磷脂酶C(PLC)測試盒可見分光光度法

    簡要描述:磷脂酶C(PLC)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:瓊脂培養(yǎng)基L 英文名稱:Agar medium L 產(chǎn)品規(guī)格:250g 瓊脂培養(yǎng)基M 英文名稱:Agar medium M (Triple sugar,iron agar) 產(chǎn)品規(guī)格:250g 瓊脂培養(yǎng)基N 英文名稱:Agar medium N (Cetrimide agar) 產(chǎn)品規(guī)格:250g 瓊脂培養(yǎng)基O 英文名稱:Agar medi

    • 產(chǎn)品型號:
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時間:2023-12-27
    • 訪  問  量:980

    詳細介紹

    實驗方法學:

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點:

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測定。

    特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

    產(chǎn)品名稱:磷脂酶C(PLC)測試盒可見分光光度法

    產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

    檢測方法:可見分光光度法

    產(chǎn)品貨號:BK-01S6658

    產(chǎn)品分類:脂肪酸代謝系列
    商品介紹:

    測定意義:

    磷脂酶CEC 3.1.4.3)是一種水解甘油磷酸酯C3位點甘油磷酸酯鍵的脂類水解酶,廣泛存在于微生物及動植物的組織和細胞中,在細胞代謝、細胞傳遞、生長發(fā)育等方面具有重要作用。

    測定原理

    磷脂酶C催化水解NPPC產(chǎn)生對硝基,在410nm處有特征吸收峰。

    自備實驗用品及儀器

    天平、研缽、超速冷凍離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

    所需的儀器和用品:

    可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

    建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

    樣本和試劑浪費!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

    勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

     

    細菌/細胞樣本:

    先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

    【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

    QQ截圖20220307153537.png 

    注意事項:

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

    2、對照管只需要做一管。

    3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

    對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。

    若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。

    250mL Citrate Buffer(檸檬酸鹽緩沖液),0.5M,pH5.5   Citrate Buffer,0.5M,pH5.5   常溫保存

    100次 超快非醇核酸沉淀劑 Magic Solution DNABACK 4℃保存

    2 ug pGL4.26 pGL4.26 低溫運輸,-20℃保存

    伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基(Levine) Levine EosinMethylene Blue Agar Medium 250g

    1瓶 HCT-8/FU細胞株 HCT-8/FU 低溫運輸和保存

    乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(含小倒管) Lactose Peptone Broth 10ml*20支/包

    250U T7核酸內(nèi)切 I T7 Endonuclease Ⅰ     -20℃保存

    1mL RNA Loading Buffer,6X  RNA Loading Buffer,6X  常溫保存

    1 管 E2566大腸桿菌 ER2529 E.coli Strain -80℃保存

    2 ug pRevTRE pRevTRE 低溫運輸,-20℃保存

    創(chuàng)傷弧菌成套生化鑒定管  9種*2套/盒*5盒

    磷脂酶C(PLC)測試盒可見分光光度法Rabbit anti-MG IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗爪沙鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

    Phospho-VASP(Ser239)  磷酸化管擴張刺激磷蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Phospho-PAR4 (Thr163)  磷酸化蛋白活化受體4抗體 規(guī)格: 0.1ml

    TGF beta 3  轉(zhuǎn)移生因子β3(TGFβ3)抗體 規(guī)格: 0.1ml

    VILIP1  神經(jīng)視錐蛋白樣1抗體(神經(jīng)鈣蛋白) 規(guī)格: 0.2ml

    Rabbit Anti-Monkey IgG  兔抗猴IgG 規(guī)格: 1mg

    FIGNL1  FIGNL1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Rabbit Anti-Goat IgM/Cy7  Cy7標記的兔抗羊IgM 規(guī)格: 0.1ml

    phospho-Tau protein(Thr231)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

    RAB40C  RAS基因家族蛋白RAB40C抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-STAT5a(Ser726)  磷酸化信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體 規(guī)格: 0.1ml

    APOD  載脂蛋白D抗體 規(guī)格: 0.2mlNectin 4  毒受體相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

    MSF/Cell division control protein septin D1  細胞周期調(diào)控蛋白D1抗體 規(guī)格: 0.2mlDNA Ligase IV/LIG4  DNA連接4抗體 0.2ml 

     


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