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    丙酮酸(PA)含量測試盒可見分光光度法

    簡要描述:丙酮酸(PA)含量測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:Fraser(FB2)添加劑 英文名稱:Fraser Supplement 產(chǎn)品規(guī)格:5ml*2 UVM培養(yǎng)基 英文名稱:UVM Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g UVM1添加劑 英文名稱:UVM Supplement1 產(chǎn)品規(guī)格:1ml*5支 FB2添加劑 英文名稱:FB2 Supplement 產(chǎn)品規(guī)格:2ml*20支

    • 產(chǎn)品型號(hào):
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時(shí)間:2023-12-27
    • 訪  問  量:1090

    詳細(xì)介紹

    注意事項(xiàng):

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

    2、對照管只需要做一管。

    3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

    對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

    若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

    特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

    產(chǎn)品名稱:丙酮酸(PA)含量測試盒可見分光光度法

    產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

    檢測方法:可見分光光度法

    產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6590

    產(chǎn)品分類:三羧酸循環(huán)系列
    商品介紹:

    測定意義:

    丙酮酸通過乙酰CoA連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝,起著重要的樞紐作用。

    測定原理:

    丙酮酸與2,肼作用,生成丙酮酸-2,腙,在堿性溶液中呈櫻紅色。

    需自備的儀器和用品:

    可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。

    所需的儀器和用品:

    可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

    建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

    樣本和試劑浪費(fèi)!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

    勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

     

    細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

    先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

    【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

    QQ截圖20220307153537.png 

    實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點(diǎn):

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測定。

    2 ug pECFP-Nuc pECFP-Nuc 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    CIN-1添加劑  1ml*5

    5g  Streptomycin Sulfate 4℃保存

    木糖發(fā)酵管  20支

    50次 細(xì)胞核微量制備試劑盒 Nuclei Miniprep Kit 常溫保存

    250ml HEPES-Triton Protein Extraction Buffer  HEPES-Triton Protein Extraction Buffer  常溫保存

    30次 DNA 修復(fù)混合液  DNA Repair Mix -20℃保存

    2 ug pLOX-CWBmi1 pLOX-CWBmi1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    硫酸新(100ug)  1ml/支*5

    1瓶 PANC-1細(xì)胞株 PANC-1 低溫運(yùn)輸和保存

    結(jié)晶紫中性紅膽鹽肉湯 Neutral Red-bile Salt Peptone Glucose Medium 250g

    丙酮酸(PA)含量測試盒可見分光光度法ERCC1  DNA切除修復(fù)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlNDE1  核分布基因E同源蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

    GRAP2  生因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlSKAR  DNA聚合δ相互作用蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Rabbit Anti-Guinea pig IgM/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.1mlLaminin alpha 4  層粘蛋白α4抗體(Lamininα4) 規(guī)格: 0.2ml

    phospho-CBL2(Tyr774)  磷酸化原蛋白CBL2抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-STAT1 (Tyr701)  磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 規(guī)格: 0.1ml

    MAOA  單氨氧化A抗體 規(guī)格: 0.1mlGUK1/Guanylate kinase  鳥苷酸激GMK抗體 規(guī)格: 0.2ml

    phospho-EGFR (Ser1142)  磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

    phospho-TSC1(Thr417)  磷酸化結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

    IL-11RA  白介素11受體α/IL-11Rα抗體 規(guī)格: 0.2ml

    SNX1/Sorting nexin1  分選連接蛋白1抗體 0.2ml

    CPT2  肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移2抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Mel18/ZNF144  鋅指蛋白蛋白144抗體 規(guī)格: 0.2ml

    PRDX5/PRDX6  過氧化還原5/6抗體 規(guī)格: 0.1ml 

     


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