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    中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測(cè)試盒微量法

    簡(jiǎn)要描述:中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:吡哆醇Y培養(yǎng)基 英文名稱:Pyridoxine Y medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 假單胞cfc選擇性培養(yǎng)基 英文名稱:Pseudomonas CFC Selective Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 可溶性淀粉培養(yǎng)基 英文名稱:Soluble Starch Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g AK瓊脂(2號(hào)) 英文名稱:AK Agar(No.2)

    • 產(chǎn)品型號(hào):
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時(shí)間:2023-12-26
    • 訪  問(wèn)  量:591

    詳細(xì)介紹

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

    1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

    2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。

    3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

    4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

    與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

    ① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

    ② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

    ③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

    ④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

    ⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

    本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    檢測(cè)方法

    貨號(hào)

    中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測(cè)試盒微量法

    100管/48樣

    微量法

    BK-01S6711

    商品介紹:

    測(cè)定意義:

    蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH,將高等植物Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。                          

    NI主要存在于細(xì)胞質(zhì)中,負(fù)責(zé)分解細(xì)胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。

    測(cè)定原理:

    NI催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過(guò)光吸收增加速率來(lái)計(jì)算NI活性

    自備用品:

    可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

    試劑組成和配制:

    提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

    試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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    操作步驟:

    1. 樣品的準(zhǔn)備:

    a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

    b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

    d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

    e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

    2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

    a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

    注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

    b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

    c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

    50T 流行性出血熱漢坦病毒PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    0.1mg 山羊抗小鼠IgG,熒光素488標(biāo)記 Goat Anti-Mouse IgG ,IF488 Conjugate  4℃保存

    2 ug pBIND pBIND 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    10mL TE緩沖液,PH8.5  

    2 ug pFastBac1 pFastBac1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基(2015藥典) Sabouraud Dextrose Broth 250g

    1瓶 C3H/10T1/2,Clone 8細(xì)胞株 C3H/10T1/2,Clone 8 低溫運(yùn)輸和保存

    大腸菌群顯色培養(yǎng)基 Coliform Chromogenic Medium 1000(ML)

    50U T4 DNA 聚合  T4 DNA Polymerase -20℃保存

    500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH4.4   Phosphate Buffer,0.2M, pH4.4   常溫保存

    0.1mL×10 BL21(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 BL21 (DE3) Competent Cell -80℃保存

    中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測(cè)試盒微量法Rabbit anti-human IgM whole serum  兔抗人IgM抗清 規(guī)格: 1ml

    Lingo-1  Nogo受體反應(yīng)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Adenovirus 5 E1A  毒早期E1A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Rabbit Anti-human sIgA/Cy7  Cy7標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1ml

    Peptide YY/PYY  酪酪肽抗體 規(guī)格: 0.2ml

    HIG1/HIGD1A  缺氧誘導(dǎo)基因1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    ART4/CD297  二磷酸苷核糖基轉(zhuǎn)移4抗體 規(guī)格: 0.2ml

    VEGF  管內(nèi)皮生因子抗體 0.1ml

    CQ028  多基因下調(diào)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    APE/Girdin  肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格: 0.1ml

    beta-Amyloid(31-35)  β淀粉樣肽(31-35)抗體 規(guī)格: 0.1ml

     


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