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    漆酶測(cè)試盒可見分光光度法

    簡(jiǎn)要描述:漆酶測(cè)試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:氣單胞菌鑒別瓊脂/Aeromonas Differential Agar進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Aeromonas Differential Agar250克分離培養(yǎng)和鑒別氣單胞菌曲霉菌鑒別瓊脂基礎(chǔ)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)AFPA250克曲霉菌分離培養(yǎng)血液增菌進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Blood Enrichment Medium250克用于血液中致病菌的增菌培養(yǎng)糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Bromc

    • 產(chǎn)品型號(hào):
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時(shí)間:2023-12-24
    • 訪  問  量:935

    詳細(xì)介紹

    特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

    產(chǎn)品名稱:漆酶測(cè)試盒可見分光光度法

    產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣

    檢測(cè)方法:可見分光光度法

    產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6938

    產(chǎn)品分類:其它系列
    商品介紹:

    測(cè)定意義:

    漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強(qiáng)的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測(cè)方面有非常廣泛的應(yīng)用。

    測(cè)定原理

    漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS,測(cè)定ABTS自由基的增加速率,可計(jì)算得漆酶活性。

    自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

    天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

    所需的儀器和用品:

    可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

    建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

    樣本和試劑浪費(fèi)!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

    勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

     

    細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

    先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

    【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

    QQ截圖20220307153537.png 

    實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點(diǎn):

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測(cè)定。

    1 管 BL21(DE3)plysS大腸桿菌 BL21(DE3)plysS E.coli Strain -80℃保存

    2 ug pBaBe-puro pBaBe-puro 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    HBI創(chuàng)傷弧菌生化鑒定條(GB)  5條/盒

    250ML MABT Washing Solution,5X MABT Washing Solution,5X 常溫保存

    DG-18瓊脂 DG-18 Agar 250g

    10g L-(+) 乳酸鋰鹽 Lithium L-Lactate  室溫干燥保存

    50T 貓PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    5mL 少突膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

    100mL BES Buffer,0.5M,pH7.4   BES Buffer,0.5M,pH7.4   常溫保存

    10mL 微量核酸沉淀劑 NA Precipitation Solution 室溫保存

    2 ug pGEX-2TK2-Linker pGEX-2TK2-Linker 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    漆酶測(cè)試盒可見分光光度法Phospho-NDRG1 (Thr346)  磷酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 規(guī)格: 0.1mlZO-1  胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗體(閉鎖小帶蛋白1) 規(guī)格: 0.1ml

    COBLL1  Cordon bleu蛋白樣1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-MEK1/2(Ser218/222)  磷酸化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體 規(guī)格: 0.1ml

    MMP-11  基質(zhì)金屬蛋白-11抗體 規(guī)格: 0.1mlCNTNAP3   接觸蛋白相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

    GPD2  線粒體甘油三磷酸脫2抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-PKR (Thr446/451)  磷酸化蛋白激R抗體 規(guī)格: 0.1ml

    phospho-LKB1(Ser428)  磷酸化絲/蘇蛋白激抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-HSL (Ser660)  磷酸化荷爾蒙敏脂肪抗體 規(guī)格: 0.1ml

    CXorf36  脫羧蛋白體36抗體 規(guī)格: 0.2mlDRD1  多巴胺受體D1抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Rabbit Anti-human sIgA/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-human IgM/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.3ml

    GPRIN2  G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlGDNF Receptor alpha 2  膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α2抗體 規(guī)格: 0.1ml

    PEPT1  腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1mlLASS1  壽相關(guān)基因lASS1抗體 規(guī)格: 0.2ml

    phospho-CPLA2(Ser505)  磷酸化胞漿型磷脂A2抗體 規(guī)格: 0.1mlTYRO3/MER+SKY  受體酪激抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格: 0.1mlmucin3/Muc3  粘蛋白-3抗體 規(guī)格: 0.2ml

    KCNG2  心臟鉀離子通道蛋白亞基2抗體 規(guī)格: 0.2mlGLP-1 (7-36)  素樣肽-1抗體 規(guī)格: 0.1ml 

    注意事項(xiàng):

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

    2、對(duì)照管只需要做一管。

    3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

    對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

    若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

     


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